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THSWD可改善MCAO/R大鼠的脑损害
凯旋构建MCAO/R模子后,盘考诈欺THSWD和NBP对其养息效果进行了严谨的评估。限度涌现,模子组大鼠的BMI在初期(第1-3天)呈现稳步下跌趋势,随后(第4-7天)略有回升。比拟之下,THSWD和NBP养息均权贵改善了模子组大鼠的BMI弘扬(图2A)。
为了全面评估神经功能真贵,盘考进一步聘请了Longa评分、均衡木测试及转弯测试。Longa评分分析明确指出,模子组大鼠存在严重的神经功能真贵,而经THSWD或NBP养息后,评分权贵下跌至1-2分区间(图2B)。此外,这两项养息均权贵普及了大鼠的盛开相助性和均衡技艺(图2C)。转弯测试的限度也涌现,与模子组比拟,秉承高剂量THSWD和NBP养息的大鼠,其转向与损害相悖一侧的倾向取得了权贵减弱(图2D)。组织病理学层面,HE染色限度涌现,THSWD和NBP养息灵验改善了大脑皮层的病理损害和坏死情况(图2E)。更为权贵的是,与模子组比拟,THSWD和NBP的干扰均导致了梗死体积的权贵减少(图2F-G)。要而言之,THSWD在MCAO/R大鼠中展现出了优异的神经保护作用。
此外,盘考还深刻商酌了血管功能联系因子的变化。ET1看成一种热烈的血管收缩剂,其抒发在模子组中权贵加多,同期伴跟着脑血流的下跌。相悖,PDGFB和Ang1看成血管锻真金不怕火的要津因素,其抒发在模子组中权贵裁减。可是,高剂量的THSWD或NBP灵验逆转了ET1抒发的升高以及PDGFB和Ang1抒发的裁减(图2H-J)。进一步证据了THSWD在减弱血管结构损害及收复MCAO/R大鼠脑血流方面具有积极作用。图片
图2 THSWD减弱MCAO/R大鼠的脑损害
草榴论坛THSWD可改善重生血管的结构和功能
盘考聘请了LDF、Evans blue染色以及免疫荧光染色时期来进行考证。具体而言,LDF分析限度涌现,与假手术组比拟,模子组大鼠的脑区血流提防呈现出权贵的裁减趋势。可是,中剂量及高剂量的THSWD养息则灵验地促进了血流提防的收复(图3A、E)。伊文想蓝染色限度标明,THSWD在缓解MCAO/R大鼠的血脑樊篱(BBB)渗漏方面展现出了权贵的效果(图3B、F)。值得扫视的是,THSWD还权贵上调了ZO1(图3C、G)和Occludin(图3D、H)的抒发水平,这两种分子对于珍惜MCAO/R大鼠缺血侧皮质的BBB功能具有至关首要的作用。因此,不错筹谋,THSWD通过减弱MCAO/R大鼠的BBB损害,从而达到了增强血流提防的缠绵。图片
图3 THSWD收复脑血流供应并改善BBB损害
鉴于基底膜的好意思满性和周细胞粘附在珍惜血管结构和功能中的中枢性位,盘考进一步聘请了免疫荧光双象征时期,对重生血管数目(以CD31/Ki67为象征)、血管基底膜损害(以CD31/CollagenaseIV为象征)以及周细胞障翳进程(以CD31/PDGFRβ为象征)进行了深刻的评估。限度涌现,不管是THSWD一经NBP养息,均导致了CD31/Ki67、CD31/CollagenaseIV以及CD31/PDGFRβ抒发的权贵加多(图4A-F),这充分说明了THSWD在增强血管结构厚实性和促进血管生成方面的深广后劲。图片
图4 THSWD改善了重生血管的结构
收罗药理学分析
为了深刻盘考THSWD在促进血管生成方面的潜在机制,盘考借助了DAVID数据库对筛选出的靶标进行了功能富集分析(图5)。限度涌现,权贵富集的GO生物经由主要包括炎症反馈、细胞增殖与挪动的正向调控、凋一火经由及脂质代谢等要津生物行为。此外,在GO细胞要素层面,质膜、细胞溶胶及细胞质等结构也呈现出权贵富集。在GO分子功能方面,ATP谄谀、卵白激酶活性及氧化还原酶活性等功能占据首要隘位。进一神志,KEGG富集分析揭示了THSWD与多种代谢阶梯(如核苷酸代谢、嘌呤代谢、花生四烯酸代谢等)及信号通路(包括HIF-1、Notch、VEGF等信号通路)之间的权贵关联。同期,与血管生成密致联系的生物经由,如粘着斑变成、血管平滑肌收缩、血小板活化等,亦在本次分析中展现出权贵的联系性。抽象GO与KEGG的连合分析限度,盘考初步推断THSWD在促进血管生成方面的功效可能与其对血管代谢混乱的调控作用密切联系。这一发现为进一步探索THSWD的生物学功能及潜在应用提供了首要印迹。图片
图5 THSWD促进IS血管生成的收罗药理学分析
论断总之,该盘考深刻商酌了THSWD对IS重生血管结构与功能的保护作用,并揭示了其潜在的分子机制。这一发现为中医药在IS养息限制的应用提供了新的想路与阶梯,展示了中医药在养息此类疾病中的后劲和价值。
参考文件:Tang L, Wang D, Chang H, Liu Z松岛枫种子, Zhang X, Feng X, Han L. Treating ischemic stroke by improving vascular structure and promoting angiogenesis using Taohong Siwu Decoction: An integrative pharmacology strategy. J Ethnopharmacol. 2024 Oct 5;332:118372. doi: 10.1016/j.jep.2024.118372
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